365bet体育注册开户的口腔上皮和牙龈上皮组织由正常的人源性口腔上皮细胞组成. 细胞已培养成多层, 人类颊(EpiOral)和牙龈(EpiGingival)表型的高度分化模型. 这些组织在使用无血清培养基的特殊制备的细胞培养插入物上培养，并在体外细胞培养技术的前沿达到分化水平. 表面口腔和表面牙龈组织模型表现出体内样的形态和生长特征，这些特征是均匀的和高度可复制的.
外表皮和外表皮除最顶端外所有层均表达细胞角蛋白K13，而在组织上层表达细胞角蛋白K14较弱(图1)。. 这些组织还会产生自然产生的抗菌肽，称为人类β防御素(HBDs)。. EpiOral组成性表达HBD-1和HBD-3，但不表达HBD-2(图2)。. EpiGingival在除最上层外的所有层中都弱表达HBD-3，在顶端层中表达HBD-1，但不表达HBD-2(图3)。.
外植体组织与表皮(GIN-100)和表皮(ORL-200)的脂质分析见表1. 口腔和口腔外植体只含有神经酰胺2(神经酰胺NS)。. 表面牙龈和牙龈组织含有神经酰胺1, 2, 和3(也称为神经酰胺EOS), NS, and EOHP/NP, respectively).
越来越多的数据表明，口腔和上牙龈有效地提供了一种廉价的治疗方法, 非动物方法评估口腔刺激, toxicology, and pathology-related issues. 十二烷基硫酸钠(SDS)作用的代表性剂量-反应曲线, 牙膏中常用的表面活性剂, is shown in Figure 4.
图4:SDS溶液(40L)暴露1小时后对EpiOral (ORL-200)组织活力的影响. SDS的浓度选择在牙膏中通常存在的范围内(0.0 – 3.0%).
表1:体内和体外组织脂质分析. 体内的口腔和牙龈值是14个组织样本的平均值. 体外组织值来自单个批次.
粘膜和牙龈刺激
测量口腔或牙龈上皮组织活力和细胞因子释放使用直接的MTT测定或市售ELISA试剂盒, 几天内就能得到确切的结果.
Drug Delivery
外口腔和外牙龈在确定最终制剂的体外吸收潜力方面是有用的.
Model for Oral Pathologies
EpiOral已被用于研究口腔念珠菌病, oral mucositis, 以及口腔黏膜的抗菌特性.
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Tissue:
Kits: EpiOral (ORL-200)和EpiGingival (GIN-100)试剂盒由24个组织组成. ORL-606和GIN-606试剂盒由6张纸巾组成. Tissue kits contain tissues, culture medium, 使组织平衡并培养24小时, and plasticware. 有关特定试剂盒内容，请联系365bet体育注册开户.
Substrate: ORL-200和GIN-100:胶原蛋白包被，9毫米ID单孔组织培养插入物. Pore size = 0.4 µm, Inner Diameter = 0.875 cm. Surface area = 0.6 cm2. ORL-606和GIN-606:单孔组织培养插入物. Pore size = 0.4 µm, Inner Diameter = 2.5 cm. Surface area = 4.2 cm2.
Culture: At air-liquid interface.
Histology: ORL-200: 8-11个非角膜组织细胞层. GIN-100: 8-11层角膜组织.
Lot Numbers: 每周生产的纸巾批次被分配一个特定的批号. 所有组织试剂盒在细胞方面都是相同的, medium, handling, culture conditions, etc.
Shipment: 在4°C培养基中添加琼脂糖凝胶.
Shipment day: Monday.
Delivery: 周二上午通过联邦快递优先服务(美国). 美国以外:周二至周四视地点而定.
Shelf life: 包括运输时间在内，组织在使用前可在4°C下储存长达96小时. 但是，除非绝对必要，否则不建议延长储存期. In addition, 如果组织在同一天连续使用，将获得最佳的再现性, e.g. 周三早上，在4°C的温度下过夜.
Length of experiments: 培养可持续至少1周，正常形态保持良好. 培养物必须每隔一天用5.0毫升维持培养基(ORL-200-MM或GIN-100-MM). 细胞培养插入放置在6孔板的培养架(MEL-STND)或垫圈(EPI-WSHR)上，允许使用5.0 ml.
Alternative tissues:
ORL-300-FT: Full thickness ORL-200. 在含有牙龈成纤维细胞的胶原基质上培养的口腔上皮组织.
ORL-300-FT-LC: ORL-300-FT含朗格汉斯细胞.
GIN-300-FT: Full thickness GIN-100. 在含有牙龈成纤维细胞的胶原基质上培养的牙龈上皮组织.
Cells:
EpiOral
Type: 正常人口腔角质形成细胞(NHOK)分化为非角质化组织, buccal phenotype, part number ORL-200.
Genetic make-up: Single donor.
Derived from: Non-diseased, 从拔牙病人或尸体上获得的成人口腔组织. 组织的产生使用的细胞来源于没有药物使用史或口腔病理的非吸烟者.
Screened for: 艾滋病毒、乙型肝炎、丙型肝炎、支原体、细菌、酵母菌、真菌.EpiGingival
Alternate donors available. 使用来自有吸烟史患者的细胞生产EpiOral (ORL-200-D2)是可行的。.
EpiGingival
Type: 正常人口腔角质形成细胞(NHOK)分化为具有角化的组织, gingival phenotype, part number GIN-100.
Genetic make-up: Single donor.
Derived from:
Non-diseased, 从拔牙病人或尸体上获得的成人口腔组织. 标准组织是由没有药物使用史或口腔病理的非吸烟者的细胞产生的.
Alternate donors available. 使用从有吸烟史的患者身上提取的细胞生产的外牙龈是可行的(GIN-100-D2)。.
Screened for: 艾滋病毒、乙型肝炎、丙型肝炎、支原体、细菌、酵母菌、真菌.
Medium:
EpiOral &EpiGingival
Base medium: Dulbecco 's Modified Eagle 's Medium (DMEM)
Growth factors/hormones: 表皮生长因子和其他专有因子
Serum: None
Antibiotics: Gentamicin 5 µg/ml
Anti-fungal agent: Amphotericin B 0.25 µg/ml
pH Indicator: Phenol red
Other additives: Proprietary
Alternatives: 不含酚红、不含抗生素、不含真菌的培养基和组织. 代理商在发货前3天撤离
Maintenance medium: ORL-200-MM or GIN-100-MM
质量控制和无菌:
Visual inspection: 所有组织都经过目视检查，如果发现物理缺陷, 纸巾被拒绝装运.
End-use testing:. 组织也暴露于1.0% Triton X-100的不同时间，使用MTT试验确定将组织活力降低到50% (ET-50)所需的暴露时间. QC规格:ORL-200: 34.85 < ET-50 < 105.78 min GIN-100: 5.47 hr < ET-50 < 10.42 hr.
Sterility: 在整个生产过程中使用的所有介质都要进行无菌检查. 维持培养基加或不加抗生素孵育1周，检查无菌性. 用于运输的24孔板上的琼脂糖凝胶也孵育1周，并检查任何污染迹象.
Screening for pathogens: 所有细胞都经过筛选，使用PCR检测HIV、乙肝和丙肝呈阴性. 然而，没有任何已知的测试方法可以完全保证细胞是无病原体的. Thus, 这些产品和所有人类衍生产品应按照CDC-NIH手册中建议的BSL-2(生物安全等级2)或更高级别处理, 微生物和生物医学实验室的生物安全,” 1998. 如需进一步帮助，请联系您的现场安全专员或365bet体育注册开户技术服务.
Notification of lot failure: 如果纸巾没有通过我们的质量检验或无菌检验, 我们会通知顾客，并在适当情况下免费更换纸巾. 因为我们的一些QC和无菌检测是在出货后完成的, 我们会尽快发出通知. 在正常情况下，ET-50故障将在周四下午5点前通知.m.; sterility failures will be notified within 8 days of shipment.
